Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病病症进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次显现消失人体内自身抗质到显现消失1HG肝炎医学征状的困难重重率在学龄前时期就有很好的所述，多个人体内自身抗质HIV的学龄前中都有70%在血清转换后10年内患上肝炎，而随访15年的学龄前这一一般而言缩减到84%。相比较之下，分之二医学1HG肝炎一半以上的HG1HG肝炎的胃癌有助于还无法赢取充分的归纳。

越发多的人开始用于分期系统对来表述1HG肝炎的困难重重：个质在显现消失多种人体内自身抗质时踏入第1过渡阶段，显现消失浓度反常时踏入第2过渡阶段，显现消失征状时踏入第3过渡阶段。一些多发人体内自身抗质HIV的个质，在1期和2期，困难重重较快，并发展为胃癌的1HG肝炎。我们先前所述了一一组在首次扫描到多种人体内自身抗质试样后多于10年无肝炎的却是快困难重重者，这一组病患人口数少，但特质却是其明确。随后，我们发现人体内自身蛋白质特异性CD8+T肝细胞自由基在困难重重较快的病患中都也就是说不发挥作用，但在早先胃癌和长期发挥作用的肝炎病患中都很很难扫描到。这有可能声称，与困难重重病患相比较，这些病患自身免疫自由基的适度增强。

更早归纳声称，尽管适度性T肝细胞(Treg)数量显现消失反常，但肝炎病患发挥作用一些功能原因，其中都之外对IL-2的自由基能力缩减。此外，肝炎病患中都的effectCD4+T肝细胞有可能对适度越来越具抵抗性，表现为effectT肝细胞的可抑制消散，自然产生的Treg和质外产生的其会Treg，以及蛋白质经历的CD4+T肝细胞中都IL-2自由基消散。本归纳的借此是所述了CD4+适度性T肝细胞(Treg)在在在却是较快困难重重者中都的特质，他们的平均比率为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX归纳是一项以人群相结合的主干归纳，在21岁以下确诊的病患亲属中都氘查1HG肝炎的危险因素。我们先前所述了长期较快困难重重者的特质，他们始终保持多重人体内自身抗质HIV将近10年，但无法显现消失肝炎的医学征状，快性或非完成性自身免疫。随后，10名继续始终保持无肝炎并愿意给予大量血液试样的较快困难重重者不属于T和B肝细胞功能归纳。在目前的归纳中都，8名快困难重重者(SP一组)，中都位比率43岁(31-72岁)，18 - 32岁相互间的人体内自身抗质HIV。所有的参与者都处于1HG肝炎困难重重的1期，尽管一些人随后丧失了人体内自身抗质对某些蛋白质的HIV自由基，然而，一名病患之前处于2期多于6年，但无法显现消失医学征状，一名病患被诊断为肝炎，该人会72岁，在采集实验者试样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据归纳中都对该酪氨酸完成了实际上归纳。裂解外周血单个氘肝细胞(PBMCs)，转用多实例流式肝细胞术和T肝细胞可抑制试验归纳酪氨酸中都Treg的基频、遗传和功能。用于FlowSOM和CITRUS(聚类检验、表征和回归)完成无监督聚类归纳，归纳Treg遗传。

结果：与身体健康酪氨酸相比较，来自快困难重重质的心灵CD4+T肝细胞的监督聚类标示显现出，激来生的心灵CD4+ Treg基频缩减，与低剂量其会的TNFR相关蛋白(GITR)传达缩减有关。一名HbA1c升高的病患与困难重重较快者和也就是说的折衷一组相比较，Treg曲谱略有不同。功能归纳声称，与身体健康酪氨酸相比较，来自较快困难重重质的Treg介导的CD4+effectT肝细胞可抑制明显受损。表现为对effectCD4+T肝细胞CD25和CD134传达的可抑制缩减。

绘出1 有系统对的遗传归纳标示显现出，CD4+Treg亚HG在快困难重重链表中都缩减。由FlowSOM聚合的Treg室，周遭在来自所有酪氨酸的来生CD4+CD45RA -肝细胞上。根据记号物传达检验显现出10个元簇:心灵T肝细胞_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T肝细胞;HLA-DR + GITR +心灵T肝细胞;线程Treg_1;线程Treg_2;线程Treg_3;和线程Treg_4。(a)用于9个不同Treg记号聚合的10个元簇的MST。每个键值都是一个协同(100个协同)，越来越大的元协同(10个元协同)在键值一组周遭上色。每个键值中都的饼绘出说明单个记号的传达级别。(b)每个元聚类的热绘出，以标示显现出整质记号传达。(c, d)为HD一组(c)和SP一组(d)聚合绘出，以及FlowSOM辨认的每个元簇的孔洞。(e-l)相较丰度为每个metacluster装入新等分(丰度> 0.05%)已确定为HD和SP一组:线程Treg_2 (e),线程Treg_3 (f),线程Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T肝细胞(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T肝细胞(l)。红色左上方都是慈善机构SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 用于CITRUS的预测模HG证实，Treg基频的缩减是困难重重较快的标志。分级门控(a - f)和柑橘归纳(g-k)比较SP参与者和也就是说的HD参与者在CD4+CD45RA−T肝细胞上的差异。(a)子代CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群质的都是性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR传达完成裂解，模拟FlowSOM群质。(b) HD(黑点)和SP(斑点)一组以及酪氨酸SP 606(红色)中都CD25+ cd127的基频简介绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控子集的装入新等分;(c) HLA-DRloGITR−(线程Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(线程Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(线程Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+线程T cell)。(g - i)柑桔簇锥形由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3传达气压后处理，箭头突显现出的簇被辨认为SP和HD链表相互间的不同。(j)装入新等分标示显现出了在SP(斑点)和HD(灰点)一组中都，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的相较丰度(一般而言)。(k)直方绘出标示显现出每个簇的遗传(紫色)和Treg记号相较传达与取材传达(浅蓝色);上列，线程Treg_3;下面一行，线程Treg_4。取材与所有其他簇中都记号的传达有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

绘出3 与身体健康献血者相比较，困难重重较快者心灵treg的GITR缩减。每个心灵CD4+T肝细胞元簇(心灵T肝细胞_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T肝细胞;HLA-DR + GITR +心灵T肝细胞;线程Treg_2;线程Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)扫描每个传达记号的巨大变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)链表的传达热绘出(sp606不之外在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇中都所有HD(黄色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR传达串接，标示显现出直方绘出(c)和简介绘出(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(红色)所有酪氨酸之外，p< 0.05(浅蓝色)酪氨酸SP 606和也就是说的HD不之外在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR传达，从分级门控，从所有HD(黄色)、所有SP(浅蓝色)和SP 606(红色)串接，标示显现出直方绘出(e)和简介绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

绘出4 来自较快困难重重的CD4+ treg肝细胞掌控effectCD4+T肝细胞的能力缩减。SP一组用浅蓝色的新线和左上方说明，HD一组用蓝色的新线和左上方说明，红色的新线/左上方说明酪氨酸sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞完成分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被记号为CFSE, Treg按仔细观察的一般而言溶液。用抗CD3 /28微珠来生化肝细胞，指导3过后完成流式肝细胞术扫描。(a-d)与CD4+反之亦然者相较应的treg指导(自质)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者指导。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE可抑制一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制一般而言。用于HIV折衷(激来生的叛离肝细胞内含treg)近似值可抑制一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

绘出5 effectCD4+T肝细胞对较快困难重重的T肝细胞来生化的可抑制越来越脆弱。SP一组用浅蓝色的新线和左上方说明，HD一组用蓝色的新线和左上方说明，红色的新线/左上方说明酪氨酸sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞完成分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel记号，treg按仔细观察的一般而言溶液。用抗CD3 /28微珠来生化肝细胞，指导3过后完成流式肝细胞术(CD25反染)和肝生长因子归纳。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者共同指导。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE可抑制%-(b)。(c,d) CD25可抑制%-(c)和CD134可抑制%-(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指导中都的传达。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

事实：我们得显现出的事实是，来自较快困难重重子的来生化心灵CD4+Treg在GITR传达中都赢取了引入和丰富，强调了促使归纳Treg在1HG肝炎可能性个质中都的一般而言的重要性。

原文显现出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28